7,8-二羟基黄酮对感染性休克大鼠心肌细胞的预防性保护作用

目的 观察7,8-二羟基黄酮(7,8-Dihydroxyflavone,7,8-DHF)对感染性休克大鼠心肌细胞的预防性保护作用.方法 采用盲肠结扎穿孔术(Cecal ligation puncture,CLP)建立大鼠感染性休克模型.将40只健康雄性成年大鼠随机分为假手术组(Sham)、感染性休克组(CLP)、Sham+7,8-DHF组及感染性休克+7,8-DHF组(CLP+7,8-DHF),各10只.CLP+7,8-DHF组在行CLP术后立即一次性腹腔注射7,8-DHF 5 mg/kg;Sham+7,8-DHF组行假手术,并与感染性休克+7,8-DHF组同时一次性腹腔注射7,8-DHF 5 mg/kg.分别于关闭腹腔时、术后2 h、4 h、8 h、12 h留取血样进行酶联免疫吸附法检测血清肌钙蛋白I(cTn1)和氨基末端脑钠肽前体(NT-proBNP)水平.处死大鼠后,检测心脏组织丙二醛、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶水平.另外采用Western blotting法检测大鼠心肌的Caspase-3、Cleaved caspase-3、Bcl-2及Bax表达情况,实时荧光定量PCR法(qPCR)检测白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)及肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)的表达水平.结果 与Sham组相比,CLP组大鼠血清cTn1水平在术后呈时间依赖性升高(均P<0.05),而7,8-DHF处理可使其水平降低(均P<0.05),各组的NT-pro BNP水平变化趋势与cTnI一致.感染性休克大鼠心脏组织的丙二醛活性增加(P<0.05),而超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性降低(均P<0.05),给予7,8-DHF可逆转该变化(均P<0.05).Western blotting结果与Sham组相比,感染性休克大鼠心肌表达Bcl-2蛋白水平明显降低(P<0.05),Cleaved caspase-3及Bax蛋白表达增高(均P<0.05),而7,8-DHF处理可使大鼠心肌表达的Bcl-2蛋白水平升高(均P<0.05),Cleaved caspase-3及Bax蛋白表达降低(均P<0.05).此外,qPCR结果与Sham组相比,CLP组大鼠心肌细胞表达IL-6及TNF-α水平明显升高(P<0.05).与CLP组相比,CLP组+7,8-DHF组大鼠心肌表达的IL-6及TNF-α水平降低.结论 7,8-DHF可降低CLP大鼠血清cTn1及NT-pro BNP水平,增强抗氧化产物活性,抑制氧化产物、凋亡蛋白及炎症因子的表达,从而预防性保护心肌细胞减轻感染性休克损伤.