人巨细胞病毒感染树鼩原代肝细胞的研究

目的 研究人巨细胞病毒AD169标准株(HCMV AD169)是否能感染树鼩肝原代细胞,为进一步研究人巨细胞病毒感染树嗣的动物模型研究打下基础.方法 2014年6月起取一只树嗣肝脏,分离并培养树嗣原代肝细胞,利用感染剂量MOI分别为0、0.1和1的HCMV AD169感染肝细胞,在不同时间点(12、24、48、72、120 h)检测细胞培养液上清中病毒TCID50滴度,间接免疫荧光法检测肝细胞内HCMV AD169 PP65蛋白表达,RT-PCR法检测培养肝细胞内HCMV AD169 UL49 mRNA,并对PCR结果进行测序并碱基序列比较.结果 细胞培养液上清病毒TCIDS0滴度显示,HCMV AD169能在树鼩肝细胞内复制,间接免疫荧光法可以观察到肝细胞内病毒复制旺盛,RT-PCR和测序分析确证树嗣肝细胞内病毒为HCMV AD169.结论 HCMV AD169能感染体外培养的树鼩原代肝细胞,试实验具有一定的局限性,不能完全说明HCMV AD169感染树鼩动物的成功.