尼古丁对小鼠精子顶体的影响

目的 研究尼古丁对小鼠精子顶体的影响.方法 将C57BL/6J品系雄性小鼠随机分为尼古丁组(n=20)和对照组(n=20),尼古丁组每日腹腔注射0.2 mg/100 g尼古丁,对照组注射等体积生理盐水,连续处理5周;采用转录组测序(RNA-Seq)方法检测尼古丁处理前、后的精子RNA转录组表达水平.通过实时定量聚合酶链反应(PCR)验证测序结果,将测序结果进行生物信息学分析;利用试剂盒测定顶体酶活性,络合异硫氰酸荧光素的豌豆凝集素(FITC-PSA)荧光染色检测精子顶体反应率,Western blotting测定顶体酶(溶酶体酶)通路蛋白变化情况.结果 对照组reads数为2089729,尼古丁处理组reads数为1739093,共获得8699个转录本;实时定量PCR结果与RNA-Seq结果一致;尼古丁处理后顶体酶活性和顶体反应率显著升高(P<0.05);顶体酶逆转运的CLTC蛋白表达显著低于对照组(P<0.05).结论 尼古丁提高小鼠精子顶体酶的活性和顶体反应率,有可能增加顶体酶的合成.