冻融牛始基卵泡在体外三维培养的最适藻酸盐浓度

目的 探讨冻融的牛始基卵泡在体外三维培养的最适藻酸钠浓度.方法 玻璃化冷冻牛卵巢组织后复苏,加入Liberase DH酶消化,然后随机挑取始基卵泡,将其分别培养在二维的培养系统中(对照组,A组)和浓度分别为0.5％(B组)、1％(C组)、2％(D组)的藻酸钠三维培养系统中培养8d,每隔1d观察卵泡的生长情况,测量卵泡直径以及雌二醇(E2)的分泌.结果 随着培养天数增加,对照组中卵泡的完整性丧失,卵母细胞和颗粒细胞分离,而三维培养组中卵泡仍维持其完整性.体外培养8d后,D组的卵泡平均直径为(57.7±8.5) μm,大于B组和C组(P＜0.05),荧光染色后,D组的未受损卵泡率为68.4％,较B组、C组高,但仅B组、D组间有统计学差异(P＜0.05);B组、C组、D组的E2水平均随培养时间的延长而分泌增加,其中D组中的E2水平(98.5±7.8) pg/mL最高,较B组、C组高,但仅B组、D组间有统计学差异(P＜0.05).结论 藻酸钠三维培养系统较二维培养系统更适合始基卵泡的体外培养,体积浓度为2％的藻酸钠凝胶较低浓度的藻酸钠凝胶更适合始基卵泡的生长发育.