血管性痴呆早期海马神经元的线粒体-PUMA损伤机制

目的 阐明血管性痴呆早期海马神经元损伤的线粒体机制.方法 雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham)和实验组(BCCAO后7、14、21d).通过间隔1周永久性结扎双侧颈总动脉(BCCAO)制备血管性痴呆模型;Sham组大鼠暴露双侧颈总动脉,但不予以结扎.采用Western Blot技术和免疫荧光染色检测海马CA1区神经元线粒体凋亡途径的相关蛋白Bax、Bcl2、凋亡相关蛋白PUMA的蛋白表达的变化,以及线粒体功能蛋白Cyt C亚细胞分布的变化.结果 ①与Sham组相比,BCCAO各组海马CA1区Bcl2蛋白表达明显降低,而Bax蛋白表达显著升高;②激光扫描共聚焦显微镜结果显示BCCAO各组海马CA1区神经元中Cyt C与线粒体标志性蛋白TOM20的共表达较Sham组明显减少;③PUMA蛋白于BCCAO后14、21d的表达较sham组明显升高,BCCAO后7d的PUMA表达略有增加,但无显著性差异.结论 血管性痴呆早期神经元线粒体产生的损伤可能与PUMA介导的凋亡通路相关.