应用微板核酸杂交一ELISA技术对苏南地区病毒性肝炎患者及献血员TTV感染情况及基因分型的研究

应用微板核酸杂交一ELISA技术，按照Okamoto等发表的基因序列，选取TTV ORF1的保守序列作为内引物；包被探针选择一段I型、Ⅲ型同源的序列nt2350－nt2495，而显色探针I和显色探针Ⅱ则选择异源性大于50％的序列，并在显色探针的5＇端标上生物素。首先对患者及献血员标本进行套式PCR法扩增，然后将扩增产物与两条特异性探针夹心杂交，最后加底物酶联显色，用该法对苏南地区328例病毒性肝炎患者和229名献血员进行TTV检测及分型分析。 结果发现328例病毒性肝炎患者，TTV感染率为10.4％(34/328)，其中急性甲型肝炎阳性率为5.7％(2/35)，急性乙型肝炎阳性率为8.7％(8/92)，慢性乙型肝炎阳性率为11.1％(15/135)，慢性丙型肝炎阳性率为3.2％(1/31，慢性非甲－戊型肝炎阳性率为22.9％(8/35)。研究发现，TTV阳性的上述患者输过血或血液制品者占67.6％(23/34)，表明TTV感染与输血和使用血液制品有一定关系。229名献血员TTV感染率为5.7％(13／229)。 对47例TTV阳性标本进行基因分型研究，把TTV分为两个型：I型和Ⅱ型，还有部分混合感染型，其比例为34:3:10；慢性肝炎与急性肝炎TTV感染者比例为32:15。表明苏南地区TTV感染者中，慢性肝炎感染TTV的机会多于急性肝炎，I型明显多于Ⅱ型。在献血员中，ALT升高与ALT正常人群TTV感染率分别为9.3％及4.8％，提示TTV存在无症状携带状态，有必要将TTV的检测列为献血员的筛查项目。