利用实时荧光定量聚合酶链式反应快速检测鸭沙门菌

目的 为快速检测、鉴定鸭沙门菌,避免血清型误判,提高鸭沙门菌暴发应对能力,建立一种实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测方法 .方法 随机挑选60株鸭沙门菌及238株肠道常见病原菌代表菌株,针对鸭沙门菌血清型特异基因AW58_ 15605设计引物并建立qPCR检测体系,通过纯菌菌株、模拟粪便样本及临床样本评价该体系的特异度、灵敏度及检测下限.结果 60株鸭沙门菌株及临床感染的50份样本扩增结果 均为阳性,而对鸭沙门菌血清型以外的其他沙门菌及肠道菌的扩增均为阴性.对鸭沙门菌纯菌DNA的最低检测下限为8拷贝/反应.粪便模拟样本检测中,增菌后qPCR检测下限达59.10cfu/g,明显低于分离培养及增菌前.结论 本研究建立的基于特异基因的鸭沙门菌分子检测方法 具有可操作性强、特异度高、灵敏度高的特点,建议在应急情况下优先选择qPCR用于沙门菌暴发筛查、鉴别及诊断由其引起的腹泻性疾病.