ABI7900实时荧光PCR系统检测腺病毒DNA性能验证

目的:评估实时荧光聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测腺病毒(ADV)DNA的性能.方法:采集16名健康者咽拭子标本(16例),选取其中10例阴性标本.阳性标本取自1例ADV4型培养液.采用RT-PCR法检测ADV DNA,并依次对检测试剂的准确性、重复性、检测下限、抗干扰能力和特异性等性能参数进行验证及评价.结果:RT-PCR试剂检测ADV DNA的准确性和重复性均为100％,检测下限为5×102 copies/ml.加入100 g/L血红蛋白,药物阿莫西林(5μg/ml)、对乙酰氨基酚(0.15μg/ml)和布地奈德混悬液(0.5 mg/ml)干扰物质后,ADV DNA的Ct均值小于未加入干扰物质的ADV DNA Ct均值的95％的置信区间(95％CI)上限25.51,加入干扰物质未对ADV DNA检测结果造成显著影响.该试剂检测甲型H1N1流感病毒、巨细胞病毒、肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、流感嗜血杆菌和鼻病毒等常见的呼吸道病毒和细菌无交叉反应,具有较好的特异性.结论:RT-PCR法检测ADV DNA的准确性高、重复性好且灵敏度高,抗干扰能力和特异性均符合相关标准的要求,是临床检测ADV的首选方法.