尼洛替尼对二氧化硅刺激HFL-1细胞增殖及胶原合成影响

目的 观察尼洛替尼对二氧化硅(SiO2)刺激人胚肺成纤维细胞-1(HFL-1细胞)所致细胞增殖和胶原合成的影响,探讨相关作用机制.方法 ①以质量浓度为0、5、10、25、50、100 mg/L的SiO2混悬液刺激HFL-1细胞24.0 h,采用免疫印迹法检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、C-Abl、血小板衍生生长因子受体(PDGFR)的蛋白表达,筛选后续实验的SiO2剂量.②取HFL-1细胞随机分为6组,对照组不予特殊处理,溶剂对照组细胞予体积分数为0.10％的二甲基亚砜处理;SiO2刺激组细胞予剂量为50 mg/L的SiO2混悬液刺激细胞24.0 h;5、10、15 mmol/L尼洛替尼组细胞先予剂量为50 mg/L的SiO2混悬液刺激细胞24.0 h后,再予相应浓度的尼洛替尼处理24.0 h.采用MTS法检测细胞增殖率,酶联免疫吸附实验检测细胞分泌的TGF-β1水平,免疫印迹法检测细胞内TGF-β1、C-Abl、血小板衍生生长因子(PDGF)、PDGFR和Ⅰ型胶原的蛋白表达水平.结果 ①后续实验的SiO2剂量设为50 mg/L.②SiO2刺激组和3个尼洛替尼组HFL-1细胞细胞增殖率均高于对照组和溶剂对照组(P<0.05),10、15 mmol/L尼洛替尼组HFL-1细胞细胞增殖率均低于SiO2刺激组(P<0.05).SiO2刺激组HFL-1细胞TGF-β1分泌水平以及TGF-β1、Ⅰ型胶原、C-Abl、PDGFR、PDGF蛋白相对表达水平均高于对照组和溶剂对照组,15 mmol/L尼洛替尼组HFL-1细胞上述指标均低于SiO2刺激组(P<0.05),5 mmol/L尼洛替尼组HFL-1细胞上述指标与SiO2刺激组比较,差异均无统计学意义(P>0.05);10 mmol/L尼洛替尼组HFL-1细胞仅TGF-β1分泌水平和C-Abl蛋白相对表达水平低于SiO2刺激组(P<0.05).结论 尼洛替尼可抑制SiO2诱导的HFL-1细胞增殖,降低Ⅰ型胶原的表达;该过程可能是通过抑制酪氨酸激酶介导的信号通路实现.