NOX1与NF-KB对TNF-α诱导A549细胞氧化损伤的影响

目的 探讨酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶1(NOX1)和核转录因子-κB(NF-κB)在肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导A549细胞发生氧化损伤中的关系.方法 ①以质量浓度为0.0、10.0、25.0和50.0 μg/L的TNF-α刺激A549细胞,采用CCK-8实验检测各组细胞抑制率,选择合适的TNF-α刺激浓度.②取对数生长期A549细胞分为空白对照组、溶剂对照组、TNF-α组、二亚苯基碘(DPI)组和TNF-α+ DPI组进行NOX1抑制实验.取对数生长期A549细胞分为空白对照组、TNF-α组、BAY11-7082组和TNF-α+ BAY11-7082组进行NF-κB抑制实验.以蛋白印迹法检测各组细胞N OX1和p65相对表达水平,以流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)相对表达水平.结果 ①随着TNF-α剂量的增加,A549细胞的抑制率增加(P＜0.05),选择25.0 μg/L作为后续实验TNF-α刺激剂量.②TNF-α组细胞NOX1、p65蛋白及ROS相对表达水平分别高于空白对照组、溶剂对照组和DPI组(P＜0.05);TNF-α+DPI组细胞上述指标均低于TNF-α组(P＜0.05),但高于DPI组(P＜0.05).TNF-α组细胞NOX1、p65蛋白及ROS相对表达水平分别高于空白对照组和BAY11-7082组(P＜0.05),TNF-α+ BAY11-7082组细胞上述指标均低于TNF-α组(P＜0.05).结论 抑制NOX1或NF-κB均可减轻TNF-α诱导的A549细胞氧化损伤.