UPP通路参与铝致N2a细胞tau蛋白异常磷酸化的降解调控机制

目的 探讨泛素蛋白酶体途径(UPP)调控铝所致小鼠神经母细胞瘤细胞(N2a细胞)tau蛋白异常磷酸化中的降解机制.方法 取对数生长期的N2a细胞随机分为对照组和MG132组.对照组细胞分别予浓度为0和1 mmol/L氯化铝染毒24 h;MG132组细胞予浓度为5μmol/L的MG132预处理6 h后,分别予浓度为0和1 mmol/L氯化铝染毒24 h.染毒结束后,收集细胞,采用免疫印迹法检测N2a细胞中tau-5、P-tau181、P-tau231、P-tau262、P-tau396、热休克蛋白70(Hsp70)羧基末端结合蛋白(CHIP)和Hsp70水平,采用酶联免疫吸附实验测定泛素水平.结果 析因分析结果显示,N2a细胞中tau-5、P-tau231、P-tau262、P-tau396、CHIP、Hsp70、泛素的蛋白相对表达水平在氯化铝染毒和MG132处理的主效应及两者的交互效应上均有统计学意义(P<0.05).在对照组和MG132组,氯化铝染毒的N2a细胞中tau-5、P-tau231、P-tau262、P-tau396、CHIP、Hsp70、泛素的蛋白相对表达水平均高于无氯化铝染毒的N2a细胞(P<0.05).无论是否予氯化铝染毒,MG132组N2a细胞中的tau-5、P-tau231、P-tau262、P-tau396、CHIP、Hsp70、泛素的蛋白相对表达水平均高于对照组(P<0.05).N2a细胞中P-tau181蛋白相对表达水平在氯化铝染毒和MG132处理的主效应及两者的交互效应上均无统计学意义(P>0.05).结论 UPP参与调控铝所致N2a细胞中tau蛋白异常磷酸化的经蛋白酶体降解过程,主要调控了P-tau231、P-tau262、P-tau396位点;UPP通路中CHIP和Hsp70在该过程中发挥重要作用.