长波和中波紫外线对 HaCaT 细胞DNA 损伤拉曼光谱对比研究
China Occupational Medicine(2014)
摘要
目的:通过分析长波紫外线( UVA)和中波紫外线( UVB)对HaCaT细胞作用后DNA拉曼光谱,从分子水平探索两者对HaCaT细胞DNA损伤作用的差异。方法取对数生长期的HaCaT细胞随机分为对照组、UVA组和UVB组。对照组3个样品,不进行紫外辐照(相当于照射前);后2组分别于接受UVA和UVB照射(累计照射剂量分别为8.26×10-2和2.97×10-2 J/cm2)后,培养至照后0.5、1.0、2.0、3.0、4.0和5.0 h时收获细胞提取DNA,每个时间点3个样品。采用激光共焦拉曼光谱倒置显微镜系统记录各组HaCaT细胞全基因组DNA的拉曼光谱,对特征谱线进行归属,观察照射前后拉曼光谱特征谱线相对强度(Ιn/Ι0)变化。结果鸟嘌呤氢键、磷酸基静电斥力、腺嘌呤碱基分子内能和腺嘌呤碱基堆积力特征频率分别是669、1094、1230和1344 cm-1。 UVB组鸟嘌呤氢键、磷酸基静电斥力、腺嘌呤碱基分子内能的特征频率Ιn/Ι0均小于UVA组( P<0.01);上述3个指标在紫外辐射类型和照后时间的交互效应上均有统计学意义(P<0.01),UVB的损伤作用峰值均出现在照后1.0 h。 UVB组腺嘌呤碱基堆积力特征频率Ιn/Ι0大于UVA组( P<0.01);紫外辐射类型和观察时间的交互效应有统计学意义( P<0.01),UVB的损伤作用峰值出现在照后3.0 h。结论 UVB的损伤作用对HaCaT细胞DNA的鸟嘌呤氢键、磷酸基静电斥力、腺嘌呤碱基分子内能和腺嘌呤碱基堆积力的损伤作用比UVA大,UVB的损伤作用峰值出现在照后1.0~3.0 h。
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关键词
Ultraviolet radiation,Ultraviolet A,Ultraviolet B,DNA damage,Raman spectroscopy,HaCaT cell
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