肺纤维化昆明小鼠模型的构建
Journal of Preventive Medicine of Chinese People's Liberation Army(2020)
Abstract
目的 通过探索不同剂量和方法 制作KM雄鼠肺纤维化的动物模型,寻求稳定的肺纤维化动物模型及合理的建模剂量,为研究中医药治疗肺纤维化的作用提供更接近人体肺纤维化的动物模型.方法 培养健康SPF级昆明小鼠36只,首先选取18只小鼠进行预实验,随机分为雾化组(n=12)、滴入组(n=3)以及对照组(n=3).雾化组各选3只动物分别气管内雾化吸入不同剂量(2,5,8,10 mg/kg)的博莱霉素(BLM),滴入组采用注射器经气管软骨环间隙朝向心端刺入气管缓慢注入BLM(5 mg/kg),对照组气管内雾化吸入相同体积的生理盐水.所有小鼠于造模后第14天处死,取肺组织行HE、Masson染色和检测肺组织中羟脯氨酸(HYP)的含量.根据预实验结果 进行多次给药实验,选取15只小鼠采用随机数字法分为5组,一次给药组分别为成模后1周组(21d组)和成模后2周组(28 d组),二次给药组分别为14天成模组(24 d组),成模后1周组(31 d组),成模后2周组(38 d组).每组均采用前期液滴雾化吸入BLM(8 mg/kg),体积为0.2 ml.二次给药组在第一次给药后间隔10天再次给予相同剂量、体积的BLM.取各组肺组织行HE、Masson染色.结果 随着BLM剂量的增加,各实验组中HYP含量也随之升高,到8 mg/kg时HYP的含量达到最高.结合HYP含量越高,表明该组实验动物肺损伤越严重.而一次给药组造模后1周(21 d组)、2周(28 d组)HE染色切片细胞完整性仍然没有恢复,纤维化仍然存在.二次给药组肺组织细胞损伤和纤维化更加明显,损伤的持续性更久.结论 经滴入及雾化吸入BLM均能建立昆明小鼠模型,而雾化吸入剂量为8 mg/kg且在第10天二次给药动物模型更稳定.
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