miR-93-5p对非小细胞肺癌A549细胞增殖和迁移的影响

Journal of Tropical Medicine(2019)

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摘要
目的 研究miR-93-5p对非小细胞肺癌A549细胞增殖和迁移的影响,并探讨其作用机制.方法 体外培养非小细胞肺癌细胞和正常肺细胞,检测细胞中miR-93-5p、P53表达水平,将A549细胞分为miR-93-5p低表达(miR-93-5p inhibitor)组、阴性对照(NC)组和空白对照(CK)组,转染48 h后,CKK-8法检测细胞增殖情况,Transwell实验检测细胞迁移能力,生物信息学预测P53是miR-93-5p的直接靶标,进一步采用双荧光素酶实验进行验证,蛋白免疫印迹(Western Blot)检测miR-93-5p低表达对P53蛋白表达及STAT3信号通路相关蛋白表达的影响.结果 与正常肺细胞比较,H1299、HCC827、A549肺癌细胞中miR-93-5p表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05),P53表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);转染miR-93-5p inhibitor后,A549细胞中miR-93-5p、p-STAT3、JAK、STAT3表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05),P53相对表达量增加,差异有统计学意义(P<0.05);与CK组、NC组相比,A549细胞的增殖、迁移能力均下降,差异有统计学意义(P<0.05);TargetScan数据库预测显示P53是miR-93-5p的直接靶标,双荧光素酶报告基因试验证实二者存在靶向关系.Western Blot结果显示:过表达P53后,与CK组、NC组相比,A549细胞中P53蛋白相对表达量增加,差异有统计学意义(P<0.05),p-STAT3、JAK、STAT3蛋白表达水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 MiR-93-5p可通过靶向P53调控STAT3信号通路的激活,进而调控肺癌A549细胞的增殖与迁移.
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