一种肝组织内含环状双链HBV基因组DNA的小鼠模型

目的 建立在肝组织内含双链环状乙型肝炎病毒(HBV)基因组DNA的小鼠模型.方法 用PCR扩增HBV单拷贝线状基因组,将PCR产物转染Huh7、HepG2以及293T细胞,以ELISA检测培养细胞上清中的HBsAg和HBeAg;用尾静脉高压水动力法将PCR产物注射C57BL/6J小鼠,以免疫组化检测小鼠肝组织中的HBcAg,ELISA检测小鼠血清中的HBsAg、HBeAg.细胞转染以及小鼠体内实验均用质粒pAAV-HBV1.2作为阳性对照.结果 HBV基因组PCR产物转染Huh7、HepG2以及293T细胞均可分泌表达HBsAg和HBeAg,其中HBeAg的检测值分别为质粒pAAV-HBV1.2转染细胞的88.7％、79.9％和53.7％;PCR产物注射小鼠后,肝组织检测到HBcAg,血清中检测到HBsAg和HBeAg,HBsAg和HBeAg最长持续时间分别为59 d和38 d,血清中HBsAg和HBeAg水平以及持续时间与质粒pAAV-HBV1.2注射的小鼠总体相似.结论 建立了一种新的HBV转基因小鼠模型,该模型制备方法简单,并且肝组织内存在与HBV cccDNA类似的HBV基因组.