TRPC1对人肾癌细胞A498增殖和迁移的影响

目的：探讨瞬时受体电位C1（TRPC1）对人肾癌细胞A498细胞增殖和迁移的影响。方法利用荧光定量PCR检测人肾癌细胞A498、786-O和GRC-1中TRPC1的表达水平。设计并合成靶向TRPC1的特异性shRNA，通过脂质体转染法转染TRPC1表达最高的人肾癌细胞A498以构建稳定低表达TRPC1细胞株，通过免疫印迹法和荧光定量PCR来验证shRNA的干扰效率；通过MTT比色法检测干扰后细胞的增殖能力；通过Transwell小室测细胞迁移情况；免疫印迹法检测PI3K和AKT的表达水平。结果在3株肾癌细胞中A498的TRPC1表达量最高；特异性靶向TRPC1的shRNA能够有效下调A498细胞中TRPC1的表达；特异性shRNA干扰组细胞较其他两组细胞增殖显著减慢（F＝42．31，P＜0．01）；A498／shRNA组的迁移细胞数显著低于A498组和A498／Con组（F＝24．52，P＜0．01）；A498／shRNA组细胞的PI3K和AKT蛋白的表达较A498组和A498／Con组显著下调。结论采用RNA干扰技术能够有效沉默A498细胞的TRPC1基因，并致使其细胞增殖能力下降以及细胞迁移能力减弱，其中可能的机制为通过调节细胞因子PI3K来调控人肾癌细胞的增殖和迁移。提示TRPC1在肾癌的发生发展中起着较为重要作用，TRPC1可能成为治疗肾癌的新靶点。