H7N9禽流感病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立与评价

目的 应用TaqMan探针实时荧光RT-PCR技术,建立一种快速检测H7N9禽流感病毒的方法.方法 针对H7N9禽流感病毒的HA和NA基因分别设计特异性引物和TaqMan-LNA探针,建立H7N9禽流感病毒特异性实时荧光RT-PCR快速检测方法.结果 本研究建立的方法对检测H7N9禽流感病毒株的灵敏度达到10 PFU/ml.该方法特异性强,与其他亚型流感病毒株及呼吸道病原体无交叉反应.与对照方法相比,本研究方法的检测阳性符合率为99.07％,阴性符合率为100％,Kappa值为0.993.结论 建立的检测试剂盒具有快速灵敏、结果准确可靠等优点,适用于H7N9禽流感病毒的分子生物学检测和监测.