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犬小孢子菌分离鉴定和胞外酶活性分析及基于ITS序列快速检测

Chinese Journal of Health Laboratory Technology(2019)

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Abstract
目的 通过分离纯化、培养特性分析和表型特征鉴定来确定头癣患者病原体犬小孢子菌,检测与分析该菌株胞外酶活性和致病功能,通过基因扩增和序列测定,建立了基于ITS序列PCR快速诊断技术.方法 采用PDA培养基划线培养,根据真菌学检查确诊犬小孢子菌感染,采用API-ZYM酶活检测系统对该犬小孢子菌临床株分别进行19种胞外酶活性检测;设计真菌5.8S rDNA和28S rDNA基因间隔序列特异性引物扩增并测序后,运用GenBank的BLAST软件搜索比对,从分子水平确诊犬小孢子菌感染.结果 头部皮肤真菌镜检阳性,经培养鉴定为犬小孢子菌;19种胞外酶检测结果显示,12种胞外酶具有活性(其中脂酶2种、肽酶3种、水解酶2种、糖发酵酶5种);该菌株扩增的ITS序列基因片段大小为737 bp,比对结果显示为犬小孢子菌特异性序列.结论 犬小孢子菌可导致头癣病,其临床症状及致病机制可能与其所分泌的12种胞外酶活性有关,结合培养特性和临床表现,通过PCR快速诊断技术,能够快速准确地鉴别出犬小孢子菌感染.
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