利用F0F1-ATPase免疫生物传感器快速检测人肠道病毒71型的研究

目的 从嗜热菌中提取载色体Chromatophore,利用F0F1-ATPase构建一种生物传感器,用于人肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)的快速、简便、特异检测.方法 制备F0F1-ATPaseε亚基单克隆抗体,通过亲和素-生物素系统的连接作用,以EV71抗体为检测工具,构建一种新的F0F1-ATPaseε亚基单克隆抗体-生物素-链霉亲和素-生物素-EV71抗体的免疫生物传感器,通过比较其检测前后ATP催化合成量的不同,实现对EV71病毒的快速检测.同时,合成用于EV71检测的特异性引物探针,比较2种检测方法的结果.结果 RT-PCR检测灵敏度为10-7 mg/ml,检测时间约3h;生物传感器检测灵敏度为10-7 mg/ml,但整个实验过程仅需30 min.结论 利用F0F1-ATPase构建的免疫生物传感器可用于EV71感染的快速检测,具有一定的应用前景.