发热伴血小板减少综合征病毒蛋白Gc原核表达及免疫原性研究

目的 对原核表达发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)蛋白Gc免疫原性进行初步研究.方法 参照SFTSV HB29病毒株包膜蛋白Gc编码基因,通过大肠埃希菌密码子偏好性优化后化学合成方法得到Gc目的基因.将目的基因导入到载体pET-His中,得到表达载体pET-His-Gc.经测序确认后转化到BL21(DE3)感受态细胞中表达,纯化后进行十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western blot验证.蛋白免疫新西兰大白兔后收集兔血清进行抗体效价测定.结果 成功构建了pET-His-Gc融合蛋白表达载体,并在大肠埃希菌中得到可溶性表达,且得到的Gc蛋白具有良好的免疫原性.动物实验结果表明,3次免疫后兔血清的抗体效价可达到1∶512000.结论 实现了SFTSV包膜蛋白Ge的原核表达,为后续SFTSV包膜蛋白的研究奠定了基础.