邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯对HepG2细胞脂质代谢的影响

[目的]观察邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)及其代谢产物邻苯二甲酸(2-乙基己基)酯(MEHP)对人肝癌细胞株HepG2细胞脂肪代谢的影响,及其致肝损伤的作用机制.[方法]分别用不同浓度的DEHP(31.25、62.5、125、250、500、1 000 μmol/L)、MEHP(3.125、6.25、12.5、25、50、100、250 μmol/L)、完全培养基(阴性对照)、0.1％(体积分数)二甲基亚砜(溶剂对照)处理HepG2细胞24h、48h和72h,采用MTT试剂盒检测细胞活力.不同浓度的DEHP(10.0、250.0 μμmol/L)、MEHP(4.0、100.0 μmol/L)、完全培养基(阴性对照)、0.1％(体积分数)二甲基亚砜(溶剂对照)、0.5 mmol/L油酸(阳性对照)处理HepG2细胞48h,油红O染色法观察HepG2细胞脂肪累积.不同浓度的DEHP(2.0、10.0、50.0、250.0 μmol/L)、MEHP(0.8、4.0、20.0、100.0 μmol/L)、完全培养基(阴性对照)、0.5 mmol/L油酸、0.5 μg/mL布雷德菌素A处理HepG2细胞24h和48h,Western blot法检测细胞内固醇元件调节蛋白(SREBP-1c)、肉毒碱棕榈酰基转移酶(CPT1A)、丙二酰辅酶A脱羧酶(MLYCD)和脂肪组织三酰甘油水解酶(ATGL)的蛋白表达.[结果]与阴性对照组相比,250.0～1000.0μmol/L DEHP及50.0～250.0 μmol/L MEHP染毒组HepG2细胞存活率降低,差异具有统计学意义(P＜0.05).染毒48h后,10.0、250.0 μmol/L DEHP染毒组与4.0、100.0 μmol/L MEHP染毒组HepG2细胞内可见红色脂滴,且伴有脂滴融合现象.与阴性质对照组相比,250.0 μrmol/L DEHP或100.0 μumol/L MEHP染毒HepG2细胞24h,50.0～250.0 μmol/LDEHP或4.0～100.0 μmol/LMEHP染毒HepG2细胞48h,使CPT1A表达降低,差异具有统计学意义(P＜0.05);10.0～250.0μmol/LDEHP或4.0～100.0 μmol/LMEHP染毒HepG2细胞48h使MLYCD表达降低,差异具有统计学意义(P＜0.05);250.0μmol/L DEHP与20.0～100.0 μmol/L MEHP染毒HepG2细胞24h,10.0～250.0 μmol/L DEHP与0.8～100.0 μmol/L MEHP染毒HepG2细胞48h,可使ATGL表达降低,差异具有统计学意义(P＜0.05).[结论] DEHP及MEHP染毒可引起HepG2细胞发生脂肪堆积,其过程可能与脂肪酸β-氧化受阻及三酰甘油水解受到抑制有关.