微小RNA-27b对RAW264.7细胞生物学功能的作用及调控机制

[目的]在分析纳米二氧化钛引起巨噬细胞微小RNA(miR)表达谱改变的基础上,选择与免疫通路相关的miR-27b,探讨miR-27b对巨噬细胞RAW264.7的生物学功能及其对靶基因磷脂酰肌醇-3-激酶调节亚基3(Pik3r3)的调控作用. [方法]用Diana-mirPath在线软件对miR-27b进行生物学信息分析,并通过Targetscan软件预测靶基因位点.通过转染使RAW264.7细胞的miR-27b表达上调,采用MTT、流式细胞技术观察转染后细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡的变化,应用Western blot检测靶基因的蛋白表达水平. [结果]Diana-mirPath在线软件进行miR-27b的信号通路及靶基因分析结果显示,miR-27b参与的信号通路-lnP≥2.99(P＜0.05)的有23个,其中得分最高的通路为T细胞受体信号通路(T cell receptor signaling pathway),得分为16.89.靶基因预测结果显示Pik3r3可能是其靶基因之一.转染miR-27b模拟物后,转染组与阴性对照组相比较,光密度值无明显差异(P=0.725),细胞周期也无明显差异(G1、S和G2期分别为P=0.490,P=0.088,P=0.323),但细胞凋亡率明显增高(P=0.023).此外,转染组Pik3r3蛋白表达量无明显差异(P＞0.05).[结论] miR-27b可促进RAW264.7细胞凋亡,其调控机制尚需进一步研究.