煤焦沥青对中国仓鼠肺细胞周期和凋亡的影响

目的 探讨煤焦沥青对中国仓鼠肺(CHL)细胞c-jun、fos和表皮生长因子受体(EGFR) mRNA表达和细胞周期和凋亡的影响.方法 常规培养CHL细胞,常规消化细胞后,将细胞接种于6孑孔板中,待其融合度达到40％左右时,加入含有煤焦沥青的培养液,调整浓度至0、20、40 mg/L,分别于作用24、72 h后提取细胞总RNA,采用半定量RT-PCR技术检测c-jun、fos和EGFR mRNA的表达水平;将等量的细胞接种在50 ml的培养瓶中,待细胞融合度达到40％左右时,加入含煤焦沥青的培养液,调整浓度为0、20、40 mg/L,每组设置6个重复样品,分别加入谷胱甘肽(GSH)和N-乙酰半胱氨酸(NAC),调整浓度至0、2.5、10 mmol/L,作用120 h后收集细胞,采用流式细胞术检测细胞凋亡率和S期细胞的构成比.结果 在20 mg/L煤焦沥青作用24 h后,CHL细胞的fos、c-jun和EGFR mRNA的表达水平均高于0 mg/L剂量组,差异均有统计学意义(P＜0.05);作用72 h后c-jun和EGFR的表达水平显著高于0 mg/L剂量组(P＜0.05).在40 mg/L剂量组作用24和72 h后,fos、c-jun和EGFR mRNA的表达水平均高于0 mg/L剂量组,差异均有统计学意义(P＜0.05).煤焦沥青作用后,细胞凋亡率降低,在GSH作用下,凋亡率有所增加,NAC作用下的凋亡率增加的幅度更加明显,但以上差异均无统计学意义(P＞0.05);20 mg/L的煤焦沥青作用120 h后,S期的细胞构成显著增加(P＜0.05);GSH和NAC可以显著抑制S期的细胞构成改变,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 煤焦沥青可以诱导fos、c-jun和EGFR mRNA的表达水平和S细胞周期的构成增加、抑制细胞凋亡率,而GSH和NAC可以抑制这种诱导效应.