不同浓度孕酮对Aβ致伤神经干细胞向胆碱能神经元分化的影响

目的 研究神经甾体孕酮对Aβ25-35损伤后神经干细胞分化的影响.方法 制备神经干细胞悬液,设立只加入培养液的空白对照组和只加入Aβ25-35 5 μmol/L的AD模型组,在Aβ25-35损伤细胞模型中加入0.01、0.1、1、10、100 pmol/L的孕酮共同培养设为梯度孕酮组,应用倒置显微镜及ChAT免疫细胞化学染色观察各组神经干细胞向胆碱能神经元分化的情况.结果 不同浓度孕酮组随着浓度升高细胞数目逐渐增多,胞体逐渐饱满,突起逐渐增多而变长;各时间点AD模型组与空白对照组比较ChAT免疫阳性细胞率均明显减少,差异均有统计学意义(均P＜0.05);与AD模型组相比,不同浓度孕酮组在各时间点ChAT免疫阳性细胞率均升高,差异均有统计学意义(均P＜0.05);在14 d时10 pmol/L浓度孕酮组ChAT免疫阳性细胞率达到(9.04±1.79)％,将14 d时AD模型组及10pmol/L浓度孕酮组进行ChAT、NSE双标免疫细胞荧光染色,结果显示ChAT、NSE双标免疫细胞荧光染色为阳性.结论 孕酮可以明显保护Aβ致伤的神经干细胞向胆碱能神经元分化,使胆碱能神经元增多且呈一定浓度依赖性.