let7a在非小细胞肺癌顺铂耐药中的作用及相关机制研究

目的:研究let7a在非小细胞肺癌顺铂耐药中的作用及相关机制.方法:将人非小细胞肺癌细胞系A549及其耐药株A549/DDP作为本次实验对象进行培养,耐药细胞株需要DDP维持.培养并提取细胞总RNA,let7a用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测其在细胞中的表达水平.实验组A549中转染let7a在抑制物A549/DDP耐药株中转染let7a模拟物,对照组均不转染.将A549和A549/DDP加入顺铂中维持培养,并使用cck8试剂检测细胞存活情况,采用细胞克隆平台的方法,检测转染前后细胞增殖扩增情况,细胞凋亡情况由流失细胞检测仪检测.结果:RT-PCR检测let7a在A549与A549/DDP中的表达水平结果显示,A549/DDP中表达水平是A549细胞的(25.54±2.90)％,差异有统计学意义(P<0.05);A549转染let7a抑制物后对顺铂的敏感度下降,差异有统计学意义(P<0.05);A549和A549/DDP转染let7a抑制物后对顺铂的敏感性增加,差异有统计学意义(P<0.05).A549转染let7a抑制物后,细胞形成的克隆集落数量多于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);A549/DDP转染let7a抑制物后细胞形成的克隆集落数量少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);A549转染let7a抑制物后细胞凋亡率明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);A549/DDP转染let7a抑制物后细胞凋亡率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:let7a表达量下降可以促进A549和A549/DDP增殖,抑制细胞凋亡,出现顺铂耐药现象.