铅对原代培养星形胶质细胞谷氨酸转运体的影响

目的 探讨铅暴露对星形胶质细胞(AS)中GLAST和GLT-1蛋白表达及转运体功能的影响.方法 取出生1～3 dWistar大鼠的仔鼠星形胶质细胞进行原代培养,以胶质纤维酸性蛋白(GFAP)染色鉴定细胞纯度后,进行0(对照组)、50、100、200及400μmol/L乙酸铅染毒,染毒时间为72 h.倒置显微镜下观察细胞形态并采集图像;以AlamarBlue法检测细胞活力;以Western blot法检测GLAST和GLT-1蛋白的表达;以同位素标记法测定谷氨酸转运体功能.结果 50和100μmol/L铅暴露组的细胞形态与对照组相比,未见明显改变;200 μmol/L铅暴露72 h后,少量细胞开始脱壁,细胞间隙增大;400 μmol/L铅暴露组细胞变大,突起变短或消失,脱壁细胞数量明显增多.与对照组相比,各浓度铅暴露组的AS活力均降低(P＜0.05),100、200和400 μmol/L铅暴露组的GLT-1蛋白含量下降(P＜0.05),但各浓度铅暴露组的GLAST蛋白含量无显著改变.100、200和400 μmol/L铅暴露组的3H-Glu放射性低于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 铅暴露可明显抑制AS中GLT-1蛋白的表达,并导致AS的Glu转运体功能下降.