Snail基因甲基化与TGFβ1诱导前列腺癌细胞发生EMT的相关性研究
Journal of Molecular Diagnosis and Therapy(2019)
Abstract
目的 探讨Snail基因甲基化与转化生长因子β1(TGFβ1)诱导前列腺癌细胞上皮间质转化(EMT)过程的相关性.方法 TGFβ1诱导前列腺癌PC3、DU145细胞,通过细胞形态、划痕及侵袭实验筛选EMT明显的细胞系;利用Western blot、RT-PCR技术检测该细胞系EMT时相关Marker表达的变化,确定EMT过程中的决定性转录因子;沉默组蛋白去甲基化酶KDM4A的表达,观察前列腺癌细胞形态学及转录因子Snail表达的变化;收集前列腺良性增生组织(对照组)及Gleason分级四级以上的前列腺癌组织(实验组)各60例,检测Snail、E-cadherin和Vimentin的表达.结果 细胞形态学变化、划痕及侵袭实验证明TGFβ1诱导后前列腺癌细胞PC3具有明显的迁移及侵袭能力;Western blot、RT-PCR实验表明PC3细胞EMT时E-cadherin表达下调,Snail1和Vimentin表达上调,其中Snail1变化最为明显.免疫组化结果显示对照组E-cadherin细胞膜表达强阳性,Vimentin、Snail细胞质表达弱阳性;实验组E-cadherin细胞膜表达弱阳性,Vimentin、Snail细胞质表达强阳性.沉默KDM4A表达,PC3细胞由间质转变为上皮形态,Snail1表达上调.结论 Snail1甲基化富集程度改变与TGFβ1诱导前列腺癌细胞上皮间质转化相关.
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