采用多重置换扩增进行脊肌萎缩症的植入前遗传学诊断研究

目的 建立一种可靠、准确的植入前遗传学诊断方法,可广泛用于各种类型的脊肌萎缩症.方法 采用多重置换扩增(MDA)对单细胞进行全基因组扩增,等位基因特异性扩增SMN1外显子7进行脊肌萎缩症(SMA)致病基因检测及采用与SMN基因紧密连锁的12个短串联重复序列(STR)进行SMA的单体型分析.结果 共进行了80单个淋巴细胞及63个单卵裂球的MDA.MDA扩增效率在单淋巴细胞中为97.5％ (78/80),在单卵裂球为96.8％ (61/63).在单淋巴细胞及单卵裂球MDA产物中,总的PCR扩增效率和等位基因脱扣率(ADO)为分别为96.2％ (587/610)和8.7％ (52/597),95.5％ (722/756)和9.9％ (54/547).在单淋巴细胞MDA产物中,SMN1外显子7的PCR结果均与外周血结果相符,而单个卵裂球MDA产物中,有一个PCR扩增失败,扩增效率为98.4％ (60/61).结论 该方法可用于常见的缺失型的SMA的PGD,而且可以应用于突变型的为SMA的PGD,为进一步的临床应用奠定了基础.