非脱羧勒克菌脉冲场凝胶电泳分子分型方法建立

Endemic Diseases Bulletin(china)(2017)

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Abstract
目的 利用不同的内切酶和电泳条件评价非脱羧勒克菌的脉冲场凝胶电泳(PFGE)实验方法,建立一系列非脱羧勒克菌的PFGE方法. 方法 2013-2015年从甘肃省某婴儿奶粉加工企业车间的环境和原料中分离非脱羧勒克菌,利用溶菌酶和蛋白酶K对其裂解后,选用不同的内切酶对胶块内的核酸进行酶切,脉冲场电泳后评价分析电泳图谱,得到最佳实验方案. 结果 经过几种内切酶的对比试验后,发现Spe Ⅰ酶在本试验方案中反应稳定,酶切后条带大约为17 ~21条,且分布均匀,更适合用于图谱分析. 结论 本研究确定了非脱羧勒克菌的PFGE方法,可以为非脱羧勒克菌在食品、药品等加工过程的污染以及医院感染监测,提供溯源技术手段.
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