基于RAA荧光法快速检测呼吸道腺病毒的研究

目的 利用重组酶介导核酸扩增技术(RAA)建立快速检测呼吸道腺病毒的方法.方法 根据NCBI基因库中呼吸道腺病毒hexon基因保守序列设计引物及探针,建立RAA检测方法.构建携带腺病毒hexon基因片段的重组质粒,梯度稀释,评价RAA方法的灵敏性;用建立的RAA方法检测人偏肺病毒、人博卡病毒、呼吸道合胞病毒、人鼻病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒,验证方法的特异性.结果 用不同拷贝数hexon基因片段的重组质粒进行RAA扩增,在20min内即可得到扩增结果,最低扩增拷贝数为10拷贝/μl;与人偏肺病毒、人博卡病毒、呼吸道合胞病毒、人鼻病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒无交叉反应.结论 建立的RAA方法灵敏度和特异性高,反应快速、操作简单,适用于呼吸道腺病毒的快速检测.