结核分枝杆菌通用检测方法的建立及应用

目的 建立一种快速检测结核分枝杆菌的方法,并探讨其临床应用价值.方法 以结核分枝杆菌细胞色素氧化酶(CYP141)基因为靶点设计多对引物和探针,用BLAST软件分析其特异性,优化PCR反应条件,用国家标准品(阴性参考品15份、阳性参考品15份、最低检出量参考品4份及重复参考品10份)和124份经培养鉴定的临床样本(结核分枝杆菌阳件75份)验证方法的可靠性和临床应用价值.结果 国家阴性和阳性参考品的符合率均为100％,最低检出量参考品为不高于1×102 cfu/ml;10份重复参考品均呈阳性,对临床样本检测的灵敏性和特异性分别为96.00％、97.96％,总符合率为96.77％,一致性好(Kappa值=0.933;x2=104.21,P＜ 0.001).结论 建立了结核分枝杆菌通用型核酸检测方法,适用于卫生检疫系统和临床实验室应用.