基于p38 MAPK信号通路探讨苍膝通痹胶囊对KOA大鼠关节软骨的保护作用

目的:观察苍膝通痹胶囊治疗膝骨关节炎(KOA)模型大鼠的疗效及相关作用机制.方法:将60只4周龄SPF级健康雄性SD大鼠,随机分为空白组,模型组,二甲基亚砜(DMSO)组,苍膝通痹胶囊组,SB203580组以及苍膝通痹胶囊联合SB203580组,每组10只.除正常组外,其余各组采用改良Hulth法建立KOA模型,造模成功后,苍膝通痹胶囊组每日给予0.25 g·kg-1苍膝通痹胶囊溶液灌胃,SB203580组每日给予0.015 g·kg-1的SB203580溶液灌胃,苍膝通痹胶囊联合SB203580组组每日给予含0.015 g·kg-1 SB203580及0.25 g·kg-1苍膝通痹胶囊的混合溶液灌胃,DMSO组给予1％ DMSO溶液灌胃,模型组和空白组给予生理盐水灌胃,用药干预4周后处死、取材.苏木素-伊红(HE)染色观察软骨组织形态学改变,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测外周血上清液中白细胞介素-1β(IL-1β),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平,实时荧光定量PCR(Real-tinePCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测软骨组织中p38 MAPK信号通路中相关因子p38,p-p38,基质金属蛋白酶-13(MMP-13),Ⅱ型胶原蛋白(Collagen Ⅱ)mRNA及蛋白的表达水平,免疫组化法检测p-p38的定位表达.结果:与正常组比较,模型组关节软骨中p38,p-p38,MMP-13表达水平显著上调(P＜0.01),Collagen Ⅱ表达水平显著下调(P＜0.01),血清IL-1β,TNF-α表达水平显著上调(P＜0.01);与模型组比较,苍膝通痹胶囊组,SB203580组以及苍膝通痹胶囊联合SB203580组关节软骨中p38,p-p38,MMP-13表达水平显著下调(P＜0.01),Collagen Ⅱ表达水平显著上调(P＜0.01),血清IL-1β,TNF-α表达水平显著下调(P＜0.01).结论:苍膝通痹胶囊可有效保护KOA大鼠软骨组织,其机制可能与靶向阻断p38 MAPK信号通路有关.