肝豆汤对Wilson病模型TX小鼠脾脏免疫功能调节的作用

目的:探讨肝豆汤对Wilson病模型TX小鼠脾脏免疫功能的调节作用,并探讨相关的作用机制.方法:将小鼠分为正常组、模型组、四硫钼酸铵组、肝豆汤低、中、高剂量组,每组20只.正常组选取DL小鼠常规饲养30 d;模型组和肝豆汤低、中、高剂量组选取TX小鼠分别予生理盐水、肝豆汤(22,44,66 g·kg-1)各2 mL·kg-1 ·d-1灌胃,四硫钼酸铵组予四硫钼酸铵2 mg·kg-1·d-1灌胃,每日2次,连续30 d.上述4组采用电感耦合等离子体-质谱法(ICP-MS)测脾组织微量元素,流式细胞术检测小鼠脾组织T淋巴细胞亚群CD4+,CD8+,CD4+/CD8+;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2),白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8),白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17),白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18),γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ),肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的蛋白表达量.结果:ICP-MS结果显示:与模型组比较,肝豆汤可以降低TX小鼠脾组织铜含量(P＜0.01),流式细胞术检测显示,与正常组比较,模型组脾组织内CD4+,CD8+增高(P＜0.01),CD4 +/CD8+降低(P＜0.01),与模型组比较,肝豆汤中、高剂量组脾组织内CD4+,CD8+降低(P＜0.05),CD4 +/CD8+增高,但差异无统计学意义,肝豆汤低剂量组与模型组比较CD4+,CD8+降低,CD4 +/CD8+增高,但差异均无统计学意义;Western blot检测显示,与正常组比较,模型组脾组织内IL-2,IL-8,IL-17,IL-18,TNF-α,IFN-γ的蛋白表达量增高(P＜0.01),与模型组比较,肝豆汤中、高剂量组及四硫钼酸铵组IL-2,IL-8,IL-17,IL-18,TNF-α,IFN-γ蛋白表达量均降低(P＜0.05,P＜0.01);与模型组比较,低剂量肝豆汤组IL-2,IL-8,IL-17,TNF-α相对表达量降低(P＜0.05).结论:TX小鼠脾脏存在免疫功能紊乱,且以负向免疫调节为主.肝豆汤对TX小鼠脾脏免疫功能紊乱具有一定的改善作用.