丹酚酸B对脓毒症大鼠心肌损伤的保护作用

目的:探讨丹酚酸B(salvianolic acid B,Sal-B)对脓毒症大鼠心肌损伤的作用及机制.方法:将50只雄性SD大鼠随机分为假手术组,模型组(行盲肠结扎穿孔术复制脓毒症动物模型),Sal-B组低、中、高剂量组(在模型基础上,经尾静脉注射Sal-B 6,12,24 mg· kg-1).采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测心肌坏死标志物和炎症因子,包括血清肌钙蛋白T(TnT),肌酸激酶同工酶(CK-MB),心肌肌钙蛋白I(cTnI)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素(IL)-1β,IL-6水平;比色法检测心肌中超氧化物歧化酶(SOD)的活性和丙二醛(MDA)的含量;采用苏木素-伊红(HE)染色观察各组心肌组织病理变化;采用原位末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡情况;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测心肌组织中凋亡相关蛋白半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)和自噬微管相关蛋白轻链3(LC3),Beclin-1表达水平.结果:与假手术组比较,模型组TnT,CK-MB和cTnI水平显著升高(P＜0.01);心肌组织TNF-α,IL-1β,IL-6水平显著升高(P＜0.01);心肌组织MDA含量显著升高(P＜0.01),SOD的活力显著降低(P＜0.01),TUNEL阳性心肌细胞比率显著升高(P＜0.01),Bax和Caspase-3蛋白表达水平升高,而Bcl-2表达显著降低(P＜0.01),自噬相关蛋白LC3,Beclin-1表达水平显著升高(P＜0.01);与模型组比较,Sal-B中、高剂量组TnT,CK-MB和cTnI水平均显著降低(P＜0.01),心肌组织TNF-α,IL-1β,IL-6水平显著降低(P＜0.01),心肌组织MDA含量明显降低(P ＜0.05,P＜0.01),同时,心肌组织SOD的活性明显升高(P＜O.05,P＜0.01);TUNEL阳性心肌细胞比率明显降低(P＜0.05),Bax和Caspase-3蛋白表达下降,Bcl-2表达明显升高(P＜0.05,P＜0.01);同时增强自噬反应,LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ增加,Beclin-1表达水平明显上调(P＜0.05,P＜0.01).结论:Sal-B通过影响自噬蛋白,降低脓毒症大鼠心肌炎症反应和氧化应激,抑制心肌细胞凋亡,从而减轻脓毒症大鼠心肌的损伤.