肝癌全方及其不同治法拆方抑制SMMC7721人肝癌细胞增殖的作用

目的:探讨肝癌全方及不同治法拆方抗肿瘤作用的分子机制.方法:体外培养SMMC7721人肝癌细胞,分别给予2.5～100 g·L-1肝癌全方、清热方、活血方、健脾方干预24 h后,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖;分别采用1.25 ～20 g·L-1肝癌全方,5～20 g·L-1清热方和活血方及20 ～ 120 g·L-1健脾方干预24 h后,运用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测相关基因的表达;分别采用20 g·L-1肝癌全方和清热方,10 g·L-1活血方及120 g·L-1健脾方干预SMMC7721细胞24 h后,通过蛋白免疫印迹法检测相关蛋白的表达,通过碘化丙啶(PI)/RNase staining solution试剂染色检测细胞周期的改变.结果:与空白组比较,肝癌全方及其不同治法拆方能抑制SMMC7721细胞的增殖,并呈现量效关系(P＜0.05).与空白组比较,5～20 g·L-1清热方呈现量效抑制细胞周期依赖性激酶阻滞基因1B(CDKN1B)基因表达(P＜0.05),20 ～ 120 g·L-1健脾方也呈现量效抑制CDKN1B基因表达(P＜0.05);5～20 g·L-1肝癌全方明显抑制糖皮质激素调节蛋白激酶1(SGK1)基因表达(P＜0.05),且量效显著;5～20 g·L-1清热方量效抑制SGK1基因表达(P ＜0.05);20～120 g·L-1健脾方也抑制SGK1基因表达(P＜0.05),同时肝癌全方及清热、活血治法方可抑制SGK1磷酸化蛋白的表达(P＜0.05);1.25,20 g·L-1肝癌全方可促进叉头框蛋白O3(FOXO3)基因表达(P＜0.05);15,20 g·L-1清热方明显促进FOXO3基因表达(P＜0.05);20 g·L-1活血方促进FOXO3基因表达(P＜0.05).与空白组比较,全方组G2期细胞数增加(P＜0.05),清热组和健脾组G2期细胞数增加更明显(P＜0.05);肝癌全方及不同治法拆方能够抑制细胞周期蛋白E1(CyclinE1)蛋白的表达,其中以健脾组抑制效果最显著.结论:肝癌全方及其不同治法拆方通过改变细胞增殖和周期,从而发挥抑制肝癌的作用.