金雀花碱在山豆根肝毒性中的作用

目的:通过金雀花碱(CYT)体内和体外的肝毒性研究,探讨山豆根的肝毒性是否与CYT相关.方法:小鼠肝AML12细胞用于体外肝毒性研究,细胞增殖及细胞毒性检测(CCK-8)试剂盒检测细胞活性.分别加入终浓度为6,10,14 mmol·L-1的CYT,于加药后3,6,12,24 h,取细胞上清液,检测丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),总胆红素(TBIL)及乳酸脱氢酶(LDH)水平.急性毒性实验,小鼠分别单次口服灌胃24.8,33.1,44.2,58.9,78.5 mg· kg-CYT,设空白组.亚慢性毒性实验,小鼠随机分为3组,分别口服灌胃超纯水,11.2,14.0 mg· kg-1CYT,连续90 d.第91天小鼠麻醉后取血清检测ALT,AST,TBIL,LDH等生化指标,并做肝脏病理切片.结果:CYT的半抑制浓度(IC50)为15.17 mmol· L-1.14 mmol·L-CYT自6h起,ALT,AST释放逐渐增加,于12 h达到峰值(P ＜0.05,P＜0.01),之后有下降趋势(P＜0.01);14 mmol·L-1CYT早在给药6h,LDH释放就已经显著升高(P＜0.01),在12 h达到顶峰(P＜0.01),在24 h有下降趋势(P＜0.01);各浓度CYT在3,6,12,24 h时,较相应时间点空白组而言,TBIL释放均无显著性差异.在急性毒性实验,CYT的半数致死量(LD50)为48.16 mg·kg-1,属于全球化学品统一分类和标签制度(GSH)第2级.在亚慢性毒性实验,与空白组相比,CYT组小鼠血清ALT及LDH水平无明显差异;虽然CYT 14.0 mg·kg-1组小鼠血清TBIL含量升高(P＜0.05),AST含量下降(P＜0.05),但是均在本实验室背景数据范围内,与空白组相比,肝组织病理学切片亦无明显差异,这一结果可能与CYT14.0 mg· kg-组小鼠一半死亡,导致血液生化及肝脏病理标本量减少相关.结论:CYT属于GSH分类的经口急性毒性2级毒性物质,其在体外培养条件下具有肝细胞毒性,但是其在体内的肝毒性以及是否为山豆根肝毒性的毒性成分需要进一步研究.