化香树果序乙醇提取物调控RAS/MAPK通路对鼻咽癌细胞的影响

目的:研究化香树果序醇提物(ethanol extract of infructescence of Platycarya strobilacea,EPS)的对鼻咽癌CNE1,CNE2细胞的药理作用机制.方法:以鼻咽癌CNE1,CNE2细胞为研究对象,以EPS 0.25,0.5,1.0,1.5,2.0 g·L-1干预,设空白组,孵育24 h后,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测EPS对CNE1,CNE2细胞活力的影响.用1.0 g·L-1 EPS处理CNE1,CNE2细胞24 h,倒置显微镜观察细胞形态变化,透射电镜观察细胞器的变化.流式细胞仪检测细胞凋亡程度,RNA高通量测序检测EPS处理后细胞中的差异基因.蛋白免疫印迹法检测HRas proto-oncogene(HRAS)蛋白细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)和c-Fos proto-oncogene (c-Fos)蛋白表达水平.结果:与空白组比较,EPS能明显抑制CNE1,CNE2细胞的增殖(P＜0.05),且呈浓度依赖性.与空白组比较,EPS明显诱导CNE1,CNE2细胞质出现大量空泡,空泡相互融合,不断增大,最后细胞膜破裂,透射电镜发现细胞核没有发生明显的变化,溶酶体空泡化明显,流式结果未发现明显凋亡,与细胞methuosis死亡特征一致.高通量测序结果显示与癌蛋白(RAS)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路相关,与空白组比较HRAS,ERK1/2,c-Fos蛋白表达降低,磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2(p-ERK1/2)蛋白表达升高(P＜0.05).结论:EPS可通过调控RAS/MAPK信号通路诱导人鼻咽癌细胞CNE1,CNE2发生methuosis死亡,导致细胞相互融合,细胞内出现大量空泡.