高表达β1肾上腺素受体细胞膜色谱法靶向筛选夏天无中活性成分
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae(2015)
Abstract
目的:从夏天无中筛选与高表达β1肾上腺素受体(β1-AR)作用的活性成分,并考察其对β1-AR的抑制作用.方法:建立β1-AR细胞膜色谱与UPLC/MS联用分析方法筛选鉴别夏天无中的活性成分;用美托洛尔(10μmol·L-1),药根碱(1,5μmol·L-)处理β1-AR/CHO-S 24 h,换异丙肾上腺素(50 μmol·L-1)损伤细胞10 h后,ELISA法测定活性成分对β1-AR下游因子cAMP,PKA水平的影响,评价其对β1-AR的抑制作用.结果:药根碱是夏天无中作用于β1-AR的活性化合物;细胞实验结果表明,与ISO组相比,药根碱和美托洛尔对cAMP,PKA水平均有下调作用(P<0.01).结论:药根碱是夏天无中具有β1-AR抑制作用的活性化合物;建立的β1-AR/CMC-offline-HPLC/MS分析方法可快速有效筛选出作用靶点明确的活性成分,且筛选结果与生物效应相一致.
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β1 adrenergic receptor,cell membrane chromatography,active components,jatrorrhizine
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