基于HPLC波长切换联合梯度洗脱技术的茵栀黄口服液中15种成分定量研究

目的 建立HPLC波长切换联合梯度洗脱法(HPLC-DVD法)同时测定茵栀黄口服液中14种活性成分新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、栀子苷、对羟基苯乙酮、野黄芩苷、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C、千层纸素A苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、千层纸素A及一种辅料成分苯甲酸的含量.方法 采用HPLC-DVD法,Welch Ultimate XB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;乙腈-0.1％磷酸水溶液为流动相,进行梯度洗脱,体积流量前30 min为0.8 mL/min,后续为1.0 mL/min;新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸检测波长为325 nm,栀子苷检测波长为238 nm,对羟基苯乙酮检测波长为275 nm,苯甲酸检测波长为228 nm,野黄芩苷、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C检测波长为325 nm,千层纸素A苷、汉黄芩苷检测波长为203 nm,黄芩素、汉黄芩素、千层纸素A检测波长为274 nm;进样量为10μL.结果 15种指标成分新绿原酸在74.46～1574.42 ng(r=0.9998)、绿原酸在34.58～741.10 ng(r=0.9996)、隐绿原酸在34.65～742.62 ng(r=0.9997)、栀子苷在234.42～5024.45 ng(r=0.9999)、对羟基苯乙酮在74.46～1574.42 ng(r=0.9999)、苯甲酸在321.79～6897.10 ng(r=0.9998)、野黄芩苷在44.70～958.08 ng(r=0.9997)、异绿原酸B在32.53～697.22 ng(r=0.9995)、异绿原酸A在8.60～184.38 ng(r=0.9996)、异绿原酸C在31.93～684.30 ng(r=0.9997)、千层纸素A苷在254.82～5461.66 ng(r=0.9995)、汉黄芩苷在10.18～218.12 ng(r=0.9999)、黄芩素在92.81～1989.33 ng(r=0.9996)、汉黄芩素在31.17～668.00 ng(r=0.9995)、千层纸素A在11.74～251.73 ng(r=0.9998)与峰面积具有较好的线性关系;精密度良好,RSD≤0.75％;重复性良好,RSD≤1.95％;供试品溶液在室温条件下8 h内稳定,RSD≤1.77％;平均加样回收率和相应的RSD分别为100.69％(0.55％)、101.99％(1.78％)、99.20％(0.72％)、100.13％(0.48％)、100.96％(1.74％)、100.02％(0.46％)、101.14％(0.27％)、99.87％(0.59％)、100.21％(1.56％)、102.18％(0.33％)、99.00％(1.02％)、98.82％(0.65％)、98.31％(0.58％)、96.01％(0.44％)、100.56(0.71％).10批次供试品中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、栀子苷、对羟基苯乙酮、苯甲酸、野黄芩苷、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C、千层纸素A苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、千层纸素A的含量分别为0.246～0.322、0.213～0.290、0.203～0.267、1.786～2.047、0.035～0.046、2.393～2.541、0.263～0.392、0.139～0.216、0.032～0.067、0.208～0.250、2.120～2.648、0.063～0.102、0.081～1.429、0.164～0.246、0.079～0.110 mg/mL.结论 建立的HPLC-DVD法同时测定茵栀黄口服液中的15种成分,方法简便、快速、准确,可为茵栀黄口服液质量控制提供科学依据.