臭牡丹总黄酮通过调控Wnt/β-catenin通路影响A549细胞上皮间质转化研究
Chinese Traditional and Herbal Drugs(2018)
Abstract
目的 探讨臭牡丹总黄酮对人肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭的作用及其机制.方法 将pcDNA3.1+空载体与S45位点突变的β-链蛋白(S45A-β-catenin)真核过表达载体转染A549细胞,给予臭牡丹总黄酮干预.MTT法检测细胞的相对存活率,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell小室侵袭实验检测细胞的侵袭能力,Western blotting法检测各组细胞β-catenin、上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、转录因子Snail 2 (Slug)、糖原合成酶激酶-3β (GSK-3β)、p-GSK-3β的表达水平.结果 转染S45A-β-catenin质粒后,A549细胞增殖、迁移、侵袭能力均明显增强,β-catenin、vimentin 蛋白表达水平显著上调,E-cadherin、GSK-3β、P-GSK-3β蛋白的表达水平显著下调.臭牡丹总黄酮可抑制A549细胞的增殖、迁移与侵袭能力,对转染S45A-β-catenin质粒组的细胞作用尤为明显.对转染空载质粒的A549细胞,可上调E-cadherin、GSK-3β、P-GSK-3β表达,下调β-catenin、vimentin表达;对转染S45A-β-catenin质粒的A549细胞,可下调β-catenin、vimentin 表达.结论 抑制细胞中β-catenin的高表达并调控下游的一系列因子,从而影响Wnt/β-catenin通路诱导的上皮间质转化(EMT)现象可能是臭牡丹总黄酮抑制肺癌侵袭、转移的重要作用机制之一.
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Key words
total flavonoids of Clerodendrum bungei Steud.,EMT,Wnt/β-catenin signal pathway,β-catenin plasmid mutated at S45,proliferation,invasion,migration
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