丫蕊花甾体皂苷YB16促进A549细胞凋亡及其机制研究

目的 观察丫蕊花甾体皂苷YB16对人肺癌细胞A549凋亡的影响,并探讨其促凋亡的作用机制.方法 体外培养A549细胞,给予不同浓度的YB16干预,采用MTT比色法检测A549细胞增殖;荧光显微镜观察吖啶橙(AO)、5,5’,6,6'-四氯-1,1',3,3'-四甲基眯唑并羰花青碘化物(JC-1)染色的细胞荧光变化;流式细胞术检测碘化丙啶(PI)单染、Annexin V-FITC/PI双染、细胞线粒体膜电位(JC-1染色)的变化;采用2’,7,-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)法检测细胞活性氧(ROS)量的变化,免疫印迹法(Western blotting)检测YB16对细胞凋亡相关蛋白表达的影响.结果 丫蕊花甾体皂苷YB16显著抑制A549细胞的生长(P＜0.05),呈量效关系;随着药物浓度的增加,与对照组相比,细胞形态有显著变化;不同浓度YB16作用A549细胞后,细胞凋亡率上升(P＜0.05):细胞线粒体膜电位下降明显;细胞内ROS水平上升,具有显著性差异(P＜0.05);YB16作用A549细胞24 h后,抗细胞凋亡蛋白Bcl-2表达下降,促细胞凋亡蛋白Bax的表达增加,激活型半胱氨酸蛋白酶-3 (cleaved-Caspase-3)表达增加(P＜0.05).结论 丫蕊花甾体皂苷YB16能抑制细胞增殖,降低细胞线粒体的膜电位,提升细胞ROS水平,促进细胞凋亡,具有良好的抗肿瘤活性.