基于热敏通道TRPV1探讨中药甘遂止痛机理

目的 探讨中药甘遂对热敏通道瞬时感受器电位香草素受体1(TRPV1)的影响.方法 以电生理全细胞膜片钳技术检测不同浓度中药甘遂的75％乙醇提取物对瞬染人源TRPV1的HEK293细胞(hTRPV1/HEK293细胞)诱导产生的跨膜电流,运用TRPV1特异性拮抗剂辣椒平,观察其是否可以抑制中药甘遂诱导产生的跨膜电流,使用C57BL/6小鼠30只,观察在(0±2)℃冷板和(55±1)℃热板中小鼠冷痛、热痛行为潜伏期的变化.结果 全细胞膜片钳实验显示在hTRPV1/HEK293细胞上甘遂75％乙醇提取物可以激活TRPV1通道产生明显的跨膜电流,该跨膜电流与TRPV1激动剂辣椒素诱发的电流在电流密度和电流-电压关系各方面均类似;量效实验显示10 mg·mL-1甘遂醇提物能够激活hTRPV1/HEK293细胞诱导其产生明显的跨膜电流(P＜O.001).10mg·mL-1甘遂醇提物产生的跨膜电流＞3 mg·mL-1,差异具有极显著统计学意义(P＜0.001).TRPV1特异性拮抗剂辣椒平可以完全抑制10 mg·mL-1甘遂醇提物诱导产生的跨膜电流;小鼠冷板和热板实验中,甘遂延长小鼠的冷痛和热痛行为潜伏期与剂量呈现一定的量效关系.与空白组小鼠对比,甘遂中、高剂量组和布洛芬阳性对照组小鼠冷痛行为潜伏期明显延长,差异具有统计学意义(P＜O.05,P＜0.001,P＜O.05).甘遂中、高剂量组和布洛芬阳性对照组的热痛行为潜伏期明显延长(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.05).结论 中药甘遂的75％乙醇提物中含有TRPV1的激动剂,甘遂所具备的止痛和抗炎功效可能是热敏通道TRPV1活化后产生的系列效应.