芯片技术筛选夹脊穴预处理心肌缺血再灌注大鼠Wnt通路相关差异表达基因

目的:通过基因芯片技术筛选心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠差异表达的基因,富集分析关键通路,寻找电针夹脊穴预处理可能的保护途径.方法:72只大鼠,随机分为对照组、模型组、夹脊组、内关组、阳陵泉组、曲池组,每组12只.各针刺组电针预处理7d后,制备MIRI模型.提取缺血区心肌组织总RNA并评估质量后,进行样品标记和芯片杂交,使用Agilent Feature Extraction软件获得芯片图,GeneSpring GX v12.1软件进行Quantile标准化及数据处理,使用标准的富集计算方法进行GO分析和Pathway分析.并采用荧光定量PCR对筛选出的差异基因进行部分验证.结果:电针预处理能够调控缺血再灌注大鼠的基因表达,其中夹脊穴组对Wnt通路相关基因影响显著,共涉及10个基因:上调细胞外因子Wntgb、Wnt10b,蛋白受体Fzd2,磷脂酶C家族Plch1、plch2,DKK家族中Dkkl1及APC家族基因Amer1和Amer3;同时下调磷脂酶C家族Pclb1及Sapcd家族基因Sapcd2.这些基因在内关、阳陵泉、曲池组无显著性差异.PCR结果与芯片结果相符.结论:多条信号通路参与电针夹脊穴预处理对心肌缺血再灌注的调控,涉及多个基因.从分子水平阐明了其对MIRI的保护作用机制.