大黄(庶虫)虫丸对基因转染慢性粒细胞白血病K562细胞趋化因子受体4表达的影响

目的 探讨大黄(庶虫)虫丸治疗慢性粒细胞白血病的可能作用机理.方法 将CXCR4基因定向克隆到含有双启动子的真核表达载体pBudCE4.1,经转染入K562细胞,筛选获得能稳定高表达人CXCR4蛋白的K562/CXCR4细胞.16只裸鼠随机分为空白组和大黄(庶虫)虫丸大、中、小剂量组,每组4只.大黄(庶虫)虫丸大、中、小剂量组分别给予大黄(庶虫)虫丸270、135、70 mg/ml灌胃,每次3ml,空白组给予生理盐水3 ml灌胃,均每天1次,连续给药3天,第3天每隔2h给药1次,连续给药3次,末次给药1h后,心脏采血,分离血清,制备大黄(庶虫)虫丸含药血清.应用MTT法检测不同浓度大黄(庶虫)虫丸含药血清对K562/CXCR4细胞增殖的影响,TUNEL法检测其对K562/CXCR4细胞凋亡的影响,Western blotting法检测各组细胞CXCR4表达的变化.结果 与空白组比较,大黄(庶虫)虫丸大、中、小剂量组细胞在24、48、72、96h时吸光度A490均明显降低(P＜0.01);大黄(庶虫)虫丸大、中、小剂量组作用时间越长、药物浓度越高,细胞的抑制率越高.空白组细胞凋亡率为0.28％,大黄(庶虫)虫丸大、中、小剂量组细胞凋亡率分别为60.79％、28.91％和10.14％.大黄(庶虫)虫丸大、中、小剂量组细胞中CXCR4表达较空白组明显降低,并且随剂量增大CXCR4表达降低.结论 大黄(庶虫)虫丸可能通过抑制K562/CXCR4细胞增殖,诱导其凋亡,并影响CXCR4的表达,进而干预慢性粒细胞白血病的发生发展过程.