柚皮苷通过Runx2信号通路促进MSCs成骨分化的实验研究

目的 观察柚皮苷对骨髓间充质干细胞(MSCs)成骨分化能力的影响,并且确定促进MSCs成骨分化的最佳柚皮苷浓度.方法 用不同浓度的柚皮苷培养MSCs后,QPCR检测骨形态发生蛋白(BMP-2)表达量,同时CCK-8法检测不同浓度柚皮苷对MSCs增殖能力影响,确定最佳柚皮苷浓度.将最佳浓度柚皮苷与成骨诱导液分别或共同培养MSCs,观察其对成骨信号轴中Smad1/5/8,Runx2(Runt-related transcription factor-2),成骨细胞特异性转录因子(Osterix) mRNA及蛋白表达的促进作用.结果 柚皮苷对BMP-2 mRNA表达具有明显促进作用(P＜0.05),并且其促进作用与浓度梯度相关.较高浓度(浓度＞1×103mol/L)的柚皮苷能够降低MSCs增殖能力,差异有统计学意义(P＜0.05),而1×104mol/L及以下柚皮苷浓度对MSCs增殖无明显影响,差异无统计学意义(P＞0.05).确定1×10-4mol/L为最佳柚皮苷浓度.柚皮苷组的Runx2、Smad1/5/8及Osterix mRNA及蛋白表达水平显著高于空白组(P＜0.05).而单一成骨诱导液组对MSCs成骨促进作用较单一柚皮苷弱,差异有统计学意义(P＜0.05),柚皮苷与成骨诱导液共培养MSCs后,表达水平较单一柚皮苷组升高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 柚皮苷能够促进MSCs成骨分化,并且这一促进作用与成骨信号轴BMP-2/Smads/Runx2/Osterix表达密切相关.