六味地黄汤对5/6肾切除大鼠肾脏缺氧诱导因子-1α及Twist和E-cadherin表达的影响

目的 观察六味地黄汤对5/6肾切除大鼠肾脏缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、Twist和上皮钙黏蛋白E(E-cadherin)表达的影响,探讨六味地黄汤延缓肾纤维化的分子机制.方法 60只SD雄性大鼠随机分为空白对照组(10只)、假手术组(10只)和手术组(40只).手术组按5/6肾切除法造模处理,造模成功后将手术组(死亡1只)随机分为模型组、六味地黄汤组、依那普利组,每组13只.六味地黄汤组予以六味地黄汤6.75 g/kg灌胃,依那普利组予以依那普利10 mg/kg灌胃,空白对照组、假手术组和模型组予以等量的蒸馏水灌胃,每日1次,干预8周.于第8周末采集当日24 h尿液、腹主动脉全血、肾组织,检测各组大鼠肾功能指标,HE染色观察肾组织病理变化,Masson染色观察胶原纤维沉积并测量胶原面积百分比,免疫组化法和qPCR法分别检测肾组织HIF-1α、Twist和E-cadherin蛋白水平和基因表达.结果 24 h尿蛋白、血尿素氮和血肌酐肾功能指标,模型组较空白对照组和假手术组明显升高(P<0.05),六味地黄汤组较模型组明显降低(P<0.05);模型组大量胶原纤维沉积,纤维化明显;六味地黄汤组和依那普利组少量胶原纤维沉积,纤维化程度明显降低;与假手术组比较,模型组大鼠肾组织中HIF-1α、Twist的蛋白水平和mRNA表达明显增高(P<0.05),E-cadherin蛋白水平和mRNA表达明显降低(P<0.05);与模型组相比,六味地黄汤组和依那普利组大鼠经治疗8周后,肾组织HIF-1α、Twist的蛋白水平和mRNA表达水平均明显降低(P<0.05),E-cadherin蛋白水平和mRNA表达明显升高(P<0.05).结论 六味地黄汤可下调HIF-1α的表达,后者下调Twist的表达,上调E-cadherin表达,从而延缓肾纤维化,其作用机制与抑制肾小管上皮细胞间充质转分化有关.