附子多糖纯化工艺的优化及其毒性

目的 优化附子多糖纯化工艺,并评价其毒性.方法 在单因素试验基础上,以透析温度、透析时间、换液次数为影响因素,多糖纯度为评价指标,Box-Behnken响应面法优化纯化工艺.然后,以受精后48 h发育正常的斑马鱼胚胎作为心脏毒性模型,分别用0、6.25、12.5、25、50、100.μg/mL多糖处理,每12 h观察胚胎心脏形态、心率变化,直至96 h;以受精后10 h发育正常的斑马鱼胚胎作为心脏毒性模型,分别用0、6.25、12.5、25、50、100 μg/mL多糖处理,每12 h观察胚胎死亡率、畸形率,直至48 h.结果 最佳条件为醇沉体积分数80％,Sevage法除蛋白后于36℃下透析6次,每次31 h,多糖纯度91.89％.不同质量浓度多糖给药后,斑马鱼心率、胚胎死亡率无明显变化.结论 该方法简便可行、稳定可靠、预测性好,可用于纯化对斑马鱼无明显心脏、胚胎毒性的附子多糖.