基于MAPK、PI3K/AKT信号通路探讨散血明目片防治增殖性玻璃体视网膜病变机制

目的:通过建立兔外伤性增殖性玻璃体视网膜病变(PVR)模型,观察散血明目片对其视网膜增殖膜中磷脂酰肌醇-3(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、丝裂原活化蛋白激酶(MEK)、丝裂原活化细胞信号调节激酶(P38MAPK)蛋白的表达影响.方法:将42只新西兰大白兔随机分为空白(A)组、模型(B)组、散血明目片(C)组、PD98059干预(D)组、LY294002干预(E)组、MK-2206干预(F)组、混合抑制剂干预(G)组,每组6只.造模后30min,向D、E、F、G组玻璃体腔内分别注射0.1mL PD98059、LY294002、MK-2206及3种混合抑制剂.B、C组则予以玻璃体腔内注射0.1mL 0.9％氯化钠溶液.术后第1天,C组予以散血明目片10mg/kg溶液灌胃,除A组其余组以0.9％氯化钠溶液10mL/kg灌胃,连续28d.造模后观察眼底情况,取材后光镜下观察视网膜各层的形态结构,Western Blot法检测各组视网膜增殖膜PI3K、AKT、MEK、P38MAPK蛋白的表达情况.结果:散血明目片能够抑制炎性细胞的增殖及浸润,减少增生.与A组比较,B、C、D、E、F组PI3K蛋白表达均显著升高(P＜0.01,P＜0.05);与B组比较,各给药组PI3K蛋白表达显著降低(P＜0.01);与C组比较,D、E、F组PI3K蛋白表达显著升高(P＜0.01).与A组比较,B、D、E、F组AKT蛋白表达均显著升高(P＜0.01);与B组比较,各给药组AKT蛋白表达均显著降低(P＜0.01,P＜0.05);与C组比较,D、E、F组AKT蛋白表达显著升高(P＜0.01,P＜0.05).与A组比较,其余各组MEK蛋白表达均显著提高(P＜0.01),与B组比较,各给药组MEK蛋白表达均显著降低(P＜0.01,P＜0.05);与C组比较,D、G组MEK蛋白表达显著降低(P＜0.05),而E、F组MEK蛋白表达显著升高(P＜0.01).与A组比较,其余各组P38MAPK蛋白表达显著升高(P＜0.01,P＜0.05);与B组比较,各给药组P38MAPK蛋白表达均显著降低(P＜0.01,P＜0.05);与C组比较,D、E、F、G组P38MAPK蛋白表达均显著升高(P＜0.01).结论:散血明目片可以通过MAPK、PI3K/AKT信号通路降低PI3K、AKT、MEK、P38MAPK蛋白的表达,有效维持视网膜正常形态结构.