加味黄芪建中汤通过miR-574-5p对脾气虚Lewis肺癌小鼠Wnt/β-catenin信号转导途径的调控机制研究

目的:探讨脾气虚肺癌小鼠miR-574-5p对Wnt/β-catenin信号转导途径基因表达影响及加味黄芪建中汤干预作用.方法:从50只健康清洁级C57BL/6小鼠中随机选取30只,采用苦寒泻下法+饥饿法+疲劳法建立脾气虚证模型,大黄浓缩液灌胃,同时每日游泳至力竭,并间隔1日节食,连续14d,第15天分别从正常和模型小鼠中随机各取10只小鼠,采用比色法和ELISA法测定血清D-木糖、胃泌素水平,验证造模成功.通过接种传代肿瘤细胞悬液接种Lewis肿瘤组织后,随机将实验小鼠分为单纯肺癌组、脾气虚肺癌组和中药组,中药组给予加味黄芪建中汤灌胃,其他两组给予0.9％氯化钠溶液灌胃,连续15d.脱臼处死小鼠后,完整分离皮下肿瘤称重,完整分离肺脏,计算转移结节数,RT-PCR检测肿瘤组织miR-574-5p、QKI6、β-catenin、p27Kip1 mRNA含量,Western Blot检测肿瘤组织QKI6、β-catenin、p27 Kip1蛋白的表达.结果:脾气虚证模型组小鼠血清D-木糖和胃泌素均较正常组有明显下降(P＜0.05);与单纯肺癌组比较,脾气虚肺癌组皮下肿瘤明显增大,肺转移结节数明显增多(P＜0.05),肿瘤组织中miR-574-5p、β-catenin mRNA和蛋白的表达均明显升高,而QKI6、p27Kip1 mRNA和蛋白的表达均显著降低(P＜0.05);与脾气虚肺癌组比较,中药组肿瘤明显缩小,肺转移结节数明显减少(P＜0.05),中药组肿瘤组织中miR-574-5p、β-catenin mRNA和蛋白表达均明显降低,而QKI6、p27Kip1 mRNA和蛋白表达明显升高(P＜0.05).结论:加味黄芪建中汤对脾气虚证肺癌具有较好的治疗效果,其机制可能与降低miR-574-5p的表达进而抑制Wnt/β-catenin信号转导途径的激活有一定的联系.