蒲灵化瘀止痛方治疗子宫腺肌病小鼠的多靶点作用研究

目的:以雌激素效应相关因子、血管生成相关因子及其相互作用为靶点,探讨在子宫腺肌病(AM)小鼠疾病发生发展的不同时间段及子宫在位及异位内膜不同空间部位,蒲灵化瘀止痛方治疗AM的作用机制.方法:对8周龄ICR雌鼠施行雄鼠垂体宫腔内移植手术,术后分别饲养3个月及6个月,形成M1组及M2组(AM小鼠模型3月组及6月组).选择蒲灵化瘀止痛方为实验药物,同时将未造模同期小鼠设为正常组.各组分别给药3个月(Z1组及Z2组).运用免疫组化技术观察雌激素效应相关因子(P450、COX-2、ERa)及血管生成相关因子(VEGF、ENS、CD31、MMP-2)在模型组、用药组随疾病发生发展的不同时间段及子宫在位及异位内膜不同空间部位的变化.结果:在位内膜方面,①与正常组比较:M1及M2组CD31显著下降(P＜0.01,P＜0.05)、VEGF显著增高(P＜0.001)、MMP-2显著增高(P＜0.01);P450、COX-2、ERa表达在M1组无显著差异,P450、COX-2在M2组显著增高(P＜0.001).②M1与M2组比较:P450、COX-2、ERa表达M2组显著高于M1组(P＜0.01,P＜0.001,P＜0.05).③治疗前后比较:Z1与M1比较,VEGF、MMP-2表达显著下降(P＜0.01,P＜0.05),CD31显著升高(P＜0.001);Z2与M2比较,P450、COX-2、ERa表达下降显著(P＜0.01,P＜0.001,P＜0.05).在异位内膜方面,①与正常组比较:M1及M2组P450、COX-2表达及M2组ERa值表达均显著增高(P＜0.001,P＜0.01);②M1与M2组比较:M2组COX-2、ERa、P450表达与M1组比较有增高趋势(P=0.001,P=0.051,P=0.122);③治疗前后比较:Z1与M1比较,P450显著下调(P＜0.05)、COX-2及ERa无显著变化;Z2与M2比较,P450、COX-2、ERa下降显著(P＜0.001,P＜0.001,P＜0.05).结论:蒲灵化瘀止痛方可多靶点治疗AM.病程早期的中药治疗主要以血管生成相关因子为靶点,改善早期在位内膜的缺血缺氧状况,直接截断由此触发的雌激素生成的正反馈链.疾病的后阶段,中药治疗靶点主要是在位及异位内膜雌激素效应相关因子,通过雌激素效应的变化影响血管生成因子的变化.